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本文目录一览：

• 1、免疫组化二抗

免疫组化二抗

二抗在免疫组化中指的是能够与第一抗体特异性结合的抗体，也称为抗体的抗体。它的主要功能是放大由第一抗体识别的抗原信号，从而提高检测的灵敏度和特异性。在免疫组化实验中，第二抗体通常用于检测第一抗体与目标抗原的结合情况，并通过其标记（如荧光、放射性、化学发光或显色基团）来可视化这一结合。

在免疫组化和Western blot（WB）实验中，我们通常选择使用二抗进行显色。这不仅因为一抗结合二抗可以放大信号，更因为经济上的考量。实际上，一抗也可以直接显色，但这样做并不经济。一抗可以直接与目标蛋白结合，但要使其可见，我们还需要构建酶联抗体系统。

条件允许尽量选择进口，一抗abcam，Santa，CST等值得信赖，二抗的话国产的就行了。源性一抗如果需要做共定位，那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的，可以做组化的，二抗建议选择驴抗，这样用处多；如果说是做组织化学，那么一抗源性就无所谓了只要能用于人的组织，二抗相应配套就行。

第二抗体是能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质，去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体，兔抗AIV IgG为第二抗体。

免疫组化实验中，二抗孵育时间的设定需考虑抗体性质、组织类型及环境因素。通常，此步骤时间跨度在30分钟至1小时内适宜。例如，在检测如ER、PR等激素受体时，使用Envision二抗系统，30分钟即可达到理想效果。而对于HER2受体的检测，则需更长的1小时孵育时间，以确保结果的稳定性和准确性。

作用是检测一抗。如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），则不需要二抗。但这样成本很高，因为一种一抗只识别一种底物。所以现在的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。